Γονοτύπηση αντιγόνων αιμοπεταλίων HPA (Human Platelet Antigen genotyping)

Γενικές πληροφορίες

Τα αντιγόνα αιμοπεταλίων (HPA) είναι γλυκοπρωτεΐνες στην επιφάνεια των αιμοπεταλίων. Σημειακές μεταλλάξεις στα γονίδια που τις κωδικοποιούν οδηγούν στην ύπαρξη διαφόρων πολυμορφικών αντιγόνων. Οι πολυμορφισμοί αυτοί στα αντιγόνα των αιμοπεταλίων μπορεί να προκαλέσουν ανοσοαποκρίσεις κατά τη μετάγγιση αίματος και την εγκυμοσύνη. Οι πιο κρίσιμες επιπλοκές που προκαλούνται από τα αλλοαντισώματα που δημιουργούνται ως απόκριση στα αντιγόνα των αιμοπεταλίων είναι η ανθεκτικότητα στις μεταγγίσεις αιμοπεταλίων (PTR), η πορφύρα μετά από μετάγγιση (PTP) και η νεογνική αλλοάνοση θρομβοπενία (NAIT). Τα αντιγόνα HPA-1a και HPA-5b είναι τα πιο συνήθη υπεύθυνα αντιγόνα για τη νόσο NAIT. Η γονοτύπιση των αντιγόνων αιμοπεταλίων είναι σημαντική για τη διαχείριση αυτών των ανοσολογικών αντιδράσεων.

Στο αντιγόνο HPA-1, ο γονότυπος 1b/1b έχει συσχετιστεί με την εκδήλωση εμφράγματος του μυοκαρδίου σε νεαρή ηλικία (<55 ετών) καθώς και με αυξημένη πιθανότητα θρόμβωσης της στεφανιαίας αρτηρίας μετά από καρδιολογικές επεμβάσεις με χρήση stent. To αλληλόμορφο 1b σε συνδυασμό με το αλληλόμορφο 4G του PAI-1 γονιδίου, αυξάνουν τις πιθανότητες για έμφραγμα του μυοκαρδίου κατά 4 φορές στις γυναίκες και κατά 6 φορές στους άντρες. Οι ετεροζυγώτες για το αλληλόμορφο 1b φαίνεται ότι φέρουν αντίσταση στη δράση των αντιθρομβωτικών φαρμάκων π.χ. χορήγηση ασπιρίνης.

Μέθοδος

Για την ανίχνευση των πολυμορφισμών των αιμοπεταλιακών επιφανειακών αντιγόνων (HPA) πραγματοποιείται απομόνωση ολικού γενωμικού DNA και στη συνέχεια μέρος αυτού πολλαπλασιάζεται επιλεκτικά με τη μέθοδο της αλυσιδωτής αντίδρασης πολυμεράσης με ειδικούς εκκινητές (SSP-PCR) και ηλεκτροφόρηση των προϊόντων της αντίδρασης σε πηκτή αγαρόζης. Τα αντιγόνα που ελέγχονται με τη συγκεκριμένη μέθοδο είναι: στη γλυκοπρωτεϊνική υπομονάδα GPIIIa τα HPA-1, HPA-4, HPA-6w, HPA-8w, HPA-11w, HPA-21w, στην υπομονάδα GPIIb τα HPA-3, HPA-9w, HPA-27bw, στην υπομονάδα GP1bα το HPA-2, στην GP1a το HPA-5 και στην CD109 το HPA-15.

Είδος δείγματος

Περιφερικό αίμα σε EDTA