Μοριακή ανίχνευση γονιδιακών αναδιατάξεων των υποδοχέων γάμμα των Τ-λεμφοκυττάρων (TCRγ gene rearrangements)
Γενικές πληροφορίες
Η διάγνωση των κακοήθων λεμφωμάτων είναι μία από τις πιο δύσκολες περιπτώσεις στην ιστοπαθολογία. Αν και σε πολλές περιπτώσεις η διάγνωση είναι δυνατή μέσω ιστομορφολογικών και ανοσοϊστοχημικών δεδομένων, περιστασιακά, η διαφορική διάγνωση μεταξύ μιας διαδικασίας ενεργοποίησης και ενός κακοήθους λεμφώματος είναι δύσκολο να προσδιοριστεί.
Σε αυτές τις περιπτώσεις, η ανίχνευση κλωνικότητας μέσω μοριακής ανάλυσης των αναδιατάξεων της ανοσοσφαιρίνης (Ig) και των γονιδίων TCR είναι ένα εργαλείο μεγάλης αξίας στη διάγνωση των Β και Τ λεμφοϋπερπλαστικών διεργασιών. Οι αναδιατάξεις αυτές λαμβάνουν χώρα στις υπερμεταβλητές περιοχές των Ig και TCR γονιδίων. Κάθε ώριμο λεμφοκύτταρο παρουσιάζει μια συγκεκριμένη αναδιάταξη με μοναδικό μήκος και αλληλουχία σε αυτές τις περιοχές. Το TCRγ γονίδιο είναι ένας προτιμητέος στόχος για την ανάλυση της κλωνικότητας των Τ λεμφοκυττάρων, καθώς αναδιατάσσεται πολύ νωρίς κατά την λεμφοειδή ανάπτυξή τους.
Μέθοδος
Πραγματοποιείται απομόνωση ολικού γενωμικού DNA και ακολουθεί εκλεκτικός πολλαπλασιασμός με PCR των αναδιαταγμένων VJ τμημάτων του TCRγ γονιδίου. Στη συνέχεια ακολουθεί ανάλυση των προϊόντων σε αυτόματο γενετικό αναλυτή με τη μεθοδολογία ‘fragment analysis’.
Είδος δείγματος
Περιφερικό αίμα σε EDTA